細胞培養(yǎng)基的常見成分及功能

　　細胞培養(yǎng)基都需要相似的基本營養(yǎng)物質(zhì)，對維持生命和細胞生長至關(guān)重要。基于細胞的化學(xué)組成，水，各種來源的碳、氮和磷酸鹽，氨基酸，脂肪酸，維生素，微量元素，和鹽濃度都提供所需的濃度，以滿足細胞的生長,。根據(jù)營養(yǎng)物質(zhì)的消耗速率，需要補充關(guān)鍵組分以保持細胞的高活力，并延長培養(yǎng)時間。雖然已經(jīng)開發(fā)出了適合多種細胞類型的培養(yǎng)基，包括微生物，植物，昆蟲和哺乳動物，不同的培養(yǎng)基在基本營養(yǎng)成分方面可能大體相似，但本章節(jié)主要關(guān)注無血清、化學(xué)成分限定的CHO細胞培養(yǎng)基，主要是為了重組抗體的表達。
 

　　細胞培養(yǎng)基的常見成分及功能：
 

　　1.能量來源
 

　　每一個生長培養(yǎng)基都需要碳源，以供細胞新陳代謝。碳源通常是葡萄糖，但也可以是其他糖類，如半乳糖、己糖、果糖或其他碳源(如丙酮酸，谷氨酰胺)。葡萄糖通常以終濃度為5.5mM的含量添加，大約等于人體血液中的葡萄糖水平。然而，你可以購買葡萄糖濃度變化范圍很廣的培養(yǎng)基來滿足你的具體需求。你甚至可以購買不含葡萄糖的培養(yǎng)基，然后自己定制濃度，模擬高糖的糖尿病狀況，或者研究低糖應(yīng)激反應(yīng)。
 

　　2.緩沖液
 

　　細胞需要一種特殊的pH值從7.2到7.4，否則它們無法發(fā)揮細胞功能，以供生長和存活。在二氧化碳含量較高的培養(yǎng)器中，二氧化碳與水發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生氫離子，使培養(yǎng)基酸化。為了中和二氧化碳產(chǎn)生的酸度，并在培養(yǎng)基中保持pH值，大多數(shù)培養(yǎng)基都使用化學(xué)緩沖系統(tǒng)。然而，一些緩沖方法會干擾細胞生長。
 

　　哺乳動物細胞常見的緩沖系統(tǒng)是碳酸氫鈉，生物影響小。碳酸氫鈉與氫離子反應(yīng)生成二氧化碳，隔離它們以保持pH值。然而，碳酸氫鈉的一個缺點是，它在生理pH值上不是緩沖效果。為了避免這個問題,研究人員經(jīng)常使用替代品，如HEPES，增加某些培養(yǎng)基類型的緩沖能力。