人支氣管成纖維細(xì)胞該如何培養(yǎng)？

　　成纖維細(xì)胞(fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，細(xì)胞呈梭形或扁的星狀，具有突起。根據(jù)不同的功能活動(dòng)狀態(tài)，將細(xì)胞分為成纖維細(xì)胞和纖維細(xì)胞二型：成纖維細(xì)胞乃是功能活動(dòng)旺盛的細(xì)胞，細(xì)胞和細(xì)胞核較大，輪廓清楚，核仁大而明顯，細(xì)胞質(zhì)弱嗜堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng)；纖維細(xì)胞(fibrocy te)功能活動(dòng)不活躍，細(xì)胞輪廓不明顯，核小著色深，核仁不明顯，細(xì)胞質(zhì)少。此二型細(xì)胞可互相轉(zhuǎn)化。
 

　　人支氣管成纖維細(xì)胞培養(yǎng)：
 

　　可用酶消化法或組織塊法，其中組織塊法又因其操作簡(jiǎn)便、條件易于控制而應(yīng)用更為普遍。通常，以酶消化法獲得的成纖維細(xì)胞懸液在接種后5～10min即可見細(xì)胞以偽足初期附著，與 底物形成一些接觸點(diǎn)；然后細(xì)胞逐漸呈放射狀伸展，胞體的中心部分亦隨之變扁平；大約在接種后30min，呈現(xiàn)成纖維細(xì)胞的形態(tài)。
 

　　采用組織塊法則大約在接種后2～3天到1周左右，在接種的皮膚組織塊周圍長(zhǎng)出細(xì)胞。待細(xì)胞融合成片，鋪滿培養(yǎng)容器底壁大部分時(shí)即可進(jìn)行傳代。一般都采用 胰蛋白酶(trypsin)，將成纖維細(xì)胞從底壁消化下來(lái)后分瓶作傳代培養(yǎng)。成纖維細(xì)胞在體外培養(yǎng)條件下能保持良好的分裂增殖能力。細(xì)胞分裂時(shí)變?yōu)榍蛐危环至押笥制戒佋诟街锏谋砻娉蔀橛型黄鸬谋馄郊?xì)胞。體外培養(yǎng)的成纖維細(xì)胞，其生命期限與物種等因素有關(guān)。
 

　　例如：人支氣管成纖維細(xì)胞約可培養(yǎng)50代；恒河猴皮膚成纖維細(xì)胞能傳代超過40代；雞胚成纖維細(xì)胞則只有少數(shù)能培養(yǎng)30代；而小鼠成纖維細(xì)胞多數(shù)只能生長(zhǎng)8代左右。另外，從老年個(gè)體取得的成纖維細(xì)胞的壽命要比取自年輕者短。由于在細(xì)胞傳代和進(jìn)行體外培養(yǎng)時(shí)，細(xì)胞的生物學(xué)特性會(huì)逐漸發(fā)生一些不同于體內(nèi)的改變，故通常只將代視這正常細(xì)胞，可在此時(shí)將生長(zhǎng)旺盛的成纖維細(xì)胞凍存起來(lái)，以備將來(lái)復(fù)蘇使用，這在將培養(yǎng)的細(xì)胞由動(dòng)物實(shí)驗(yàn)向人體實(shí)驗(yàn)過渡的過程中必須給予足夠的重視。