什么是緩沖溶液?緩沖液(Buffer solution)通常是由「弱酸及其共軛堿」或「弱堿及其共軛酸」緩沖對所組成的溶液,能夠在加入一定量其他物質時減緩pH的改變。以生物實驗中常用的一種緩沖液PBS為例,是由Na2HPO4、KH2PO4組成的緩沖對,在PH5.8-8.0范圍內有較強的緩沖能力。
磷酸鹽緩沖液是無機化學及分析化學中的重要概念,分析測試中,在絡合滴定和分光光度法等許多反應里都要求溶液的pH值保持在一個范圍內,以保證指示劑的變色和顯色劑的顯色等,這些條件都是通過加入一定量的緩沖溶液達到的,所以緩沖溶液是分析測試中經常需要的一種試劑。
為了保證緩沖溶液有足夠強的緩沖能力,在配制緩沖溶液時,需要做到:
為使酸堿對的濃度比接近于1,應根據所需要維持的pH范圍選擇合適的緩沖對,使其中的弱酸的PKa等于或接近于所要求的pH。
例如,生物培養液中需用PH=7.0的緩沖溶液,已知H2PO4-的pKa2=7.21,因此,H2PO4—HPO42-是可以選擇的合適的緩沖對。如若配制PH=9.0的緩沖溶液,則可選擇NH3·H2O-NH4Cl緩沖對(pKa(NH4+)=9.25)。可見弱酸的Ka是選擇緩沖溶液的主要依據,表中列出了幾種常用的緩沖溶液。
磷酸鹽緩沖液在生化實驗或研究工作中要慎重地選擇,因為有時影響實驗結果的因素并不是緩沖液的pH值,而是緩沖液中的某種離子。如硼酸鹽、檸檬酸鹽、磷酸鹽和三羥甲基甲烷等緩沖劑都可能產生不需要的化學反應。為了防止芳香胺類的干擾以pH在10±0.2時較為適宜。為此,就需要在待測溶液中加入氨一氯化錢緩沖溶液調整和控制待測溶液的pH為10.0±0.2。