一文帶您詳細了解大鼠原代細胞

　　大鼠原代細胞培養應選用體重200g的SD大鼠，用胰酶代替膠原酶進行肝臟灌注，分離得到的肝細胞存活率大于90%，且純度很高。其中，胰酶的濃度很重要，濃度過低肝細胞消化不*，導致雜細胞和結締組織很多；過高則對肝細胞產生毒性作用，影響存活率。經反復試驗得出胰酶的濃度為0.18%，且灌流時維持溫度37℃。另外，接種密度也是影響肝細胞存活率的一個重要因素，該試驗采用細胞密度為6×105個/mL。
 

　　細胞生長狀態好，既能保證細胞活率，又能滿足下一步試驗要求。肝細胞接種4h后，需用滴管輕吹換液，去除雜細胞及未貼壁的細胞，從而保證肝細胞的純度及高存活率。在WME培養液中添加胰島素、地塞米松及胎牛血清，配成*培養液，有利于細胞的增殖分化，使細胞貼壁后拉伸變薄，形態完整，呈島狀連接；試驗發現使用自制的鼠尾膠原處理細胞板，肝細胞的貼壁效果更好。
 

　　大鼠原代細胞從機體的組織(如人組織、小鼠組織、大鼠組織和兔組織等)經蛋白酶或其它的方法獲得單個細胞并在體外進行模擬機體培養的細胞，稱為原代細胞。這類細胞生命周期有限，在有限的生命周期內需掌握好細胞的生長空間，以保持細胞群中基因型和表型的一致性。原代細胞生長緩慢，一般認為，原代細胞培養的1代和到第十代以內統稱為原代培養。原代培養的細胞一般傳至10代左右就不容易傳下去了，細胞的生長會出現停滯，大部分細胞衰老死亡。
 

　　大鼠原代細胞的分離和培養的成本可能相對更高，但原代細胞作為更接近體內環境的研究模型，可讓你的研究結論更加接近“事實”，且原代細胞的使用可減少動物實驗所需的成本開支。另外在某些人體體內無法進行的實驗，原代細胞因其高度保持了在體內的生物學特性，可在一定程度解決這個問題。