hela細胞復蘇實驗步驟

　　hela細胞(HeLa cell line)是生物學與醫學研究中使用的源自一位名叫Henrietta Lacks美國婦女的子宮頸癌細胞的細胞系。這名美國婦女在1951年死于該癌癥。為了讓Lacks保持匿名，此細胞株原宣稱是依[Helen Lane]命名。海拉細胞系被視為[不死的」(即，不同于其他一般的人類細胞，此細胞株不會衰老致死，并可以無限分裂下去)，至今都被不間斷的培養。此細胞系跟其他癌細胞相比，增殖異常迅速。海拉細胞系被George Gey分送給眾研究單位(并未通知Lacks本人也未得到她的許可)，并用作癌癥細胞模型(model cancer cells)研究。
 

　　hela細胞復蘇實驗步驟：
 

　　1.從零下80℃冰箱或者液氮罐中取出冷凍管，迅速投入37℃水浴中，使其融化(1分鐘左右)。
 

　　2.培養基緩慢稀釋至原體積的10倍以上。
 

　　3.低速離心10分鐘，吸去上清，加入新鮮的培養基培養剛復蘇的細胞。
 

　　4.六個小時細胞*貼壁后吸去含有凍存液的培養基并換成*培養基。
 

　　hela細胞傳代實驗步驟：
 

　　1.取密度80%左右的Hela細胞，吸去舊的培養基，用PBS或者Trypsin消化液潤洗細胞以減少殘留的血清對Trypsin的抑制作用。
 

　　2.吸去PBS或者Trypsin，加入Trypsin消化液，于37℃消化2~4分鐘，于倒置顯微鏡下觀察，當細胞之間出現間時或者變圓時，吸掉Trypsin消化液。(也可以直接加入適量含血清的新鮮培養基終止Trypsin的消化作用并進行吹打分離細胞，消化細胞時應靜置以避免漂浮的細胞滾動成團)
 

　　3.加入適量新鮮培養基，用移液器上下吹打數次打散細胞團塊以盡可能形成單細胞懸液，吹打均勻后，按照稀釋比例轉移至新的培養瓶中，補充*培養基并以正常培養條件培養。