選擇合適的Vero細(xì)胞應(yīng)該考慮品牌聲譽(yù)、供應(yīng)商支持、細(xì)胞來(lái)源、細(xì)胞狀態(tài)和存儲(chǔ)條件等因素,以確保所購(gòu)買的細(xì)胞能夠滿足您的實(shí)驗(yàn)需求和研究目的。是種常用的猴腎細(xì)胞系,在細(xì)胞學(xué)研究和生物制品制備中廣泛應(yīng)用。
1.品牌選擇:是種非常常見的哺乳動(dòng)物細(xì)胞系,因此市面上有許多不同品牌供應(yīng)。
-供應(yīng)商支持和服務(wù):選擇提供良好售后支持和技術(shù)服務(wù)的供應(yīng)商,以便在使用過(guò)程中獲得幫助和解決問(wèn)題。
2.細(xì)胞源選擇:來(lái)源于非洲綠猴腎細(xì)胞,國(guó)內(nèi)外供應(yīng)商提供來(lái)自不同的細(xì)胞庫(kù)或資源。在選擇細(xì)胞源時(shí),可以考慮以下因素:
-原始材料的質(zhì)量和純度:確保細(xì)胞源的純度和質(zhì)量,以避免可能的污染或混雜。
-細(xì)胞文化特性:了解供應(yīng)商提供的細(xì)胞的適用范圍、表型特點(diǎn)等,以確保其適合您的研究目的。
3.細(xì)胞狀態(tài)選擇:在購(gòu)買時(shí),可以選擇凍存細(xì)胞、傳代細(xì)胞或已經(jīng)培養(yǎng)的細(xì)胞。這取決于您的實(shí)驗(yàn)需求和實(shí)驗(yàn)計(jì)劃。
-凍存細(xì)胞:保存在液氮中的細(xì)胞,需要解凍復(fù)蘇后才能使用。
-傳代細(xì)胞:已經(jīng)經(jīng)過(guò)了幾代的細(xì)胞,可以直接用于培養(yǎng)和實(shí)驗(yàn)。
-已培養(yǎng)的細(xì)胞:已經(jīng)培養(yǎng)和擴(kuò)增的細(xì)胞,可以直接用于實(shí)驗(yàn)。
4.細(xì)胞存儲(chǔ)條件:存儲(chǔ)條件非常重要,可以根據(jù)供應(yīng)商提供的存儲(chǔ)建議來(lái)選擇合適的細(xì)胞。
-存儲(chǔ)溫度和條件:通常,凍存細(xì)胞應(yīng)該保存在液氮中,傳代細(xì)胞和已培養(yǎng)的細(xì)胞則應(yīng)該在低溫下保存,如-80°C。
-存儲(chǔ)液體:根據(jù)供應(yīng)商的建議,使用適當(dāng)?shù)募?xì)胞保存液保存細(xì)胞,以確保其保存質(zhì)量和穩(wěn)定性。
5.可能的應(yīng)用:可以用于各種實(shí)驗(yàn)應(yīng)用,如病毒培養(yǎng)、病毒傳染性研究、免疫學(xué)研究等。在購(gòu)買細(xì)胞時(shí),可以參考供應(yīng)商提供的相關(guān)應(yīng)用信息,以確定其適用性和可靠性。
Vero細(xì)胞的操作使用步驟:
1.使用含有DMEM(Dulbecco'sModifiedEagleMedium)培養(yǎng)基,加入10%胎牛血清(FBS)、青霉素和鏈霉素的混合物(濃度分別為100U/ml和100μg/ml)。
2.將Vero細(xì)胞從液態(tài)氮中取出,迅速用37℃預(yù)熱的培養(yǎng)基解凍,加入培養(yǎng)基后輕輕混勻。
3.細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí),將細(xì)胞從培養(yǎng)瓶中用0.25%胰蛋白酶-EDTA進(jìn)行消化,停止消化后加入培養(yǎng)基,通過(guò)離心收集細(xì)胞沉淀,用適量培養(yǎng)基稀釋,然后轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶中。
4.將培養(yǎng)瓶放入37℃、5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中,每2-3天更換一次培養(yǎng)基。
Vero細(xì)胞的維護(hù)保養(yǎng)方法:
1.每2-3天更換一次培養(yǎng)基,當(dāng)培養(yǎng)基變黃或有明顯的酸味時(shí)應(yīng)立即更換。
2.細(xì)胞密度不宜過(guò)高,細(xì)胞達(dá)到80-90%密度時(shí)進(jìn)行傳代以避免細(xì)胞過(guò)度增殖。
3.細(xì)胞應(yīng)保持正常的增殖狀態(tài),定期觀察細(xì)胞的形態(tài),并用顯微鏡檢查細(xì)胞的污染情況,如有污染應(yīng)立即處理。
4.當(dāng)需要長(zhǎng)時(shí)間保存Vero細(xì)胞時(shí),可將其凍存于液態(tài)氮中。凍存前應(yīng)將細(xì)胞培養(yǎng)至穩(wěn)定生長(zhǎng)期,使用1mL培養(yǎng)基和1mL二甲基亞砜混勻,將混合液添加至細(xì)胞培養(yǎng)瓶中,然后迅速轉(zhuǎn)移到液態(tài)氮中。