如何正確使用無血清凍存液凍存MG63細胞？

細 胞 基 本 信 息

細胞名稱： MG63(人骨肉瘤細胞)

細胞別稱： M-G63；MG63

細胞貨號： SNL-229

生長特性： 貼壁

培養(yǎng)條件： DMEM+10% FBS+1% P/S

培養(yǎng)環(huán)境： 空氣，95%；二氧化碳 (CO2)，5%

細胞簡介： MG63細胞是從一名患有骨肉瘤的14歲白人男性患者的左股骨中分離出來成纖維細胞形態(tài)的細胞，表達TGF-β RI、TGF-β RII，使用聚肌苷-多肽酸、環(huán)己酰亞胺和放線菌素D可以誘導MG63細胞產(chǎn)生大量干擾素。MG63細胞可以用于3D細胞培養(yǎng)，也是一種合適的轉染宿主。

MG63細胞正常生長形態(tài)照片

提問

MG63可以用無血清凍存液凍存嗎?

回答

可以使用。不同品牌的凍存液凍存效果可能不一樣，建議凍存后次日復蘇一管檢測細胞活率及狀態(tài)沒有問題后再將剩余凍存細胞放置液氮中保存。

注 意 事 項

不同品牌胰酶消化時間差別較大，注意嚴格控制消化時間

消化傳代細胞時吹打細胞注意盡量輕柔，不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細胞狀態(tài)

無血清凍存液的使用方法分享：

選擇凍存處于對數(shù)生長期的細胞有助于提高復蘇細胞存活率。

1.按照常用方法收集懸浮細胞或貼壁細胞于離心管中；

2.按照培養(yǎng)細胞密度和所用細胞凍存管的尺寸計算所需凍存細胞數(shù)；

3.取所需細胞數(shù)的細胞懸浮液置于離心管中，900rpm離心3min，棄上清；

4.加入適量的無血清型細胞凍存液于離心管中，使細胞濃度為1x106至2x106 cells/ml，緩慢地混合均勻，制成細胞混合液；

5.將離心管中的細胞混合液分裝于已標示細胞名稱的凍存管中；

6.直接將含細胞混合液的凍存管放入-80℃冰箱，過夜冷凍保存，第二天移至-196℃液氮罐。