你了解細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基嗎？

　　細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基其工作基礎(chǔ)是用合適的激索、營養(yǎng)物和促貼壁的物質(zhì)的組合置換培養(yǎng)基中的成分，專門用于神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)，它的基礎(chǔ)培養(yǎng)基是1：1的DMEM與H12的混合液，添加了胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白、黃體酗、腐胺和硒。胰島索和胰島索樣生長因子對于大多數(shù)類型細(xì)胞的存活和生長有巫要作用，硒是谷胱甘肽產(chǎn)生的合作因子，可能有助于過氧化物和超氧化物的水解，有報(bào)道說還能防止細(xì)胞的光照損傷。
 

　　隨后的其他配方如N1N3則含有較低濃度的轉(zhuǎn)鐵蛋白。未料到的是上述配方構(gòu)成的培養(yǎng)基可以支持神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系快速增殖，隨后又發(fā)展了能支持原代培養(yǎng)的各種神經(jīng)元生長的培養(yǎng)基，這種培養(yǎng)基在許多實(shí)驗(yàn)室里已取代了有血清培養(yǎng)。在某些培養(yǎng)方案中，細(xì)胞直接進(jìn)入無血清培養(yǎng)，這樣的培養(yǎng)基可以消除來自血清的不均一性。更為巫要的是，它們可用來檢測生長因子以及其他促進(jìn)神經(jīng)元存活或生長的因子，或者用來檢測那些可保護(hù)神經(jīng)元免遭環(huán)境毒物損傷的制劑。專用于神經(jīng)元的培養(yǎng)基在某些培養(yǎng)環(huán)境中還可以減低非神經(jīng)元細(xì)胞的增殖，故可使神經(jīng)元純化。
 

　　血清中含有的組分，例如血清蛋白，可作為代謝毒物清除劑使用并能聚集于培養(yǎng)基中。當(dāng)缺乏這些成分時(shí)，如神經(jīng)元在無血清培養(yǎng)基中生長時(shí)，特別容易為過氧化物及自由基傷害，這己被許多研究者注意到了。過氧化物酶以及超氧化物歧化酶可阻止培養(yǎng)基中過氧化物和超氧化物的累積，有報(bào)道講可以促進(jìn)低密度培養(yǎng)細(xì)胞的存活。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)細(xì)胞存活可為氧分壓的下降而促進(jìn)。因而，無血清培養(yǎng)基的配方常含有抗氧化劑的試劑。例如，維牛索E和丙酮酸，可作為過氧化物清除劑使用。上述這些影響在高密度培養(yǎng)時(shí)變小，特別是神經(jīng)元與膠質(zhì)共培養(yǎng)時(shí)，它們可以吸收和代謝神經(jīng)元毒性物質(zhì)如谷氨酸。
 

　　應(yīng)該注意，盡管細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基是有化學(xué)限定性的，但在培養(yǎng)過程中它仍有變動(dòng)，培養(yǎng)起始時(shí)可能有些物質(zhì)缺乏，而后細(xì)胞的產(chǎn)物可能積累，從而使培養(yǎng)基的成分改變。這其實(shí)是有另一方面的好處，即條件培養(yǎng)基(已培養(yǎng)過細(xì)胞的培養(yǎng)基)的形成，條件培養(yǎng)基常常用來增加神經(jīng)元和膠質(zhì)細(xì)胞的發(fā)育。