游離脂肪酸對非洲綠猴腎細胞凋亡的影響

　　非洲綠猴腎細胞被成功的用來培養狂犬病疫苗、乙腦疫苗等多種疫苗，在非典期間又為研究冠狀病毒做出貢獻，在醫藥研究種廣泛應用。

　　非洲綠猴腎細胞探討脂肪酸對細胞生長的影響。利用不同種類不同濃度脂肪酸處理體外培養細胞，利用光鏡觀察細胞形態，后經Hoechst/PI熒光染色和染色體DNA梯度電泳觀察細胞形態改變并確定細胞凋亡；同時應用蛋白免疫印跡反應檢測淘亡相關Bc1-2、Bax、Fas、P53和Caspase-3蛋白質表達水平。實驗結果：

　　（1）光鏡觀察顯示：細胞經脂肪酸處理后有形態上的改變，細胞產生不同程度的破損，這種損壞程度隨脂肪酸濃度遞增而加強。

　　（2）Hoechst/Pl染色表明：飽和脂肪酸和不飽和脂肪酸都可劑量依賴性的引起Vero細胞凋亡。隨濃度升高，PI著色加深，染色質邊集；Hoechst著色漸淡。

　　（3）DNA凝膠電泳顯示：經脂肪酸處理的細胞DNA呈明顯的梯度分子條帶，表現為典型的凋亡現象，此現象隨處理濃度加大而加重。

　　（4）Western-blot分析結果表明：脂肪酸處理的細胞中，Bcl-2、Bax、Fas、Caspase-3蛋白表達量發生改變，其中Bax、Fas蛋白表達量隨濃度增加而顯著上調，同時，Bc1-2蛋白含量有所降低；另外，飽和脂肪酸處理組中P53蛋白表達并無太大差異，而不飽和脂肪酸組P53含量以劑量依賴性上升。

　　實驗結果表明，隨著脂肪酸濃度的升高，Vero細胞的凋亡程度有所增加，有明顯凋亡現象。由于Bcl-2、Bax、Fas、Caspase-3和P53蛋白表達發生變化，提示，這些相關基因在脂肪酸誘導的Vero細胞凋亡過程中起到了重要的作用。